旋光法測定飼料中淀粉含量

1 實驗原理

試樣用稀鹽酸分解，將溶解的淀粉糊化并部分水解。測定澄清溶液的總旋光度，校正因溶于40%乙醇的其他物質及稀鹽酸處理后光學活性引起的旋光度用已知的系數來校正旋光度計算出的淀粉含量。

2 實驗試劑和設備

乙醇(40%)體積分數，鹽酸(分析純)，亞鐵氰化鉀(分析純)，乙酸鋅(分析純)等;分析天平，全自動旋光儀等。

3 實驗步驟

1)耗酸量的計算：

稱取約2.5g制備好的試樣(精確到1 mg)，定量轉移到50 mL錐形瓶中，加入25 ml水，振搖至形成均勻的懸濁液，將pH電極置于懸濁液中，用滴定管滴加鹽酸(0.31M)至pH為3.0，劇烈振搖懸濁液，并靜置2 min，檢查試料所消耗鹽酸是否平衡，如果在此過程中，pH升高超過3.0，再用滴定管滴加鹽酸(0.31M)，必要時可多次滴加鹽酸，直到不需要更多的鹽酸為止。

根據所用鹽酸(0.31M)體積計算出試料的耗酸量。

2)總旋光度的測定：

稱取約2.5 g制備好的試樣，精確到1 mg，定量轉移到于燥的100 mL容量瓶中，加25 ml鹽酸(0.31M)，振搖至形成均勻的懸濁液，再加人25 mL鹽酸(0.31M).

加人適量濃度的鹽酸，補償試樣的耗酸量，使容量瓶中內容物的體積變化不超過1 mL.

將錐形瓶浸人沸水浴中中，在前3 min，用力振搖錐形瓶，以避免結塊并使懸濁液受熱均勻，振搖時錐形瓶不能離開水浴。如 果 同 時測定多個試樣，錐形瓶不要同時放人水浴，每個樣品要間隔一定時間，以保持水浴沸騰。15 m in 士5s后，取出錐形瓶，立即加人溫度不超過 10℃的水(5.1)30m L，轉動錐形瓶，在流水中冷卻至20℃左右。加入5 m L亞鐵氰化鉀溶液(I) ，振搖 1min，加人 5mL乙酸鋅溶液，振搖 1min，用水稀釋至刻度，混勻，過濾，棄去初始的數毫升溶液.

用旋光儀測定濾液的旋光度(a1)o

3)乙醇溶解物的旋光度測定

稱取5g制備好的試樣，精確至1 mg定量轉移到100 mL干燥的容量瓶中中，加40 ml乙醇(40%)，振搖至形成均勻的懸濁液，然后再加40 mL乙醇.

加適當濃度的鹽酸以補充試樣的耗酸量，使瓶中內容物的體積變化不超過1 ml.

用力振搖，在室溫下靜置 1h，在此期間至少每隔 10min振搖一次。

用 乙 醇稀釋至刻度，混勻，過濾，棄去最初數毫升溶液

吸取 50 mL濾液于 100m 工容量瓶，加人2.0 m L鹽酸用力振搖，并將其浸人沸水浴中中。

15 min 士5s后，從水浴中取出容量瓶，立即加溫度不超過 10℃的水30min，轉動容量瓶并

在冷水中冷至20℃左右

加 5 mL亞鐵氰化鉀(I)溶液(5.6 .1 )，振搖 1min，加 5ml乙酸鋅溶液(5.6 .2 ) ，振搖 1m in，用水稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去最初數毫升濾液。用旋光度測定濾液的旋光度(a2)。

備注：

本方法不適用于含有在分析過程中具有光學活性，且不溶于 40%乙醇的淀粉以外的其他物質的產品，如馬鈴薯漿，甜菜的絲、葉、根、冠，酵母，大豆產品，羽扇豆、富含葡萄糖的產品，如菊首根和菊芋等，此時可用酶法測定淀粉含量，否者測定淀粉含量偏高或偏低。

直鏈淀粉超過40%時，不宜用本法測定淀粉含量，如高直鏈玉米淀粉 HylonVII。