凱氏定氮儀測定小牛血液中的揮發性鹽基氮

1 前言

牛肉含有豐富的蛋白質，氨基酸組成比豬肉更接近人體需要，能提高機體抗病能力，對生長發育及手術后、病后調養的人在補充失血、修復組織等方面物別適宜。對于人的身體健康，牛肉可謂是一“寶”，那大家知道牛身上的另一“寶”嗎？準確地說是小牛身上的一“寶”，那就是小牛的血。主要是小牛血去蛋白提取物，內含多種游離氨基酸和肽。能促進細胞對葡萄糖和氧的攝取與利用。在低血氧以及能量需增加等情況下，可以促進能量代謝，增加供血量。
      揮發性鹽基氮（TVB-N）指動物性食品由于酶和細菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質分解而產生氨以及胺類等堿性含氮物質。此類物質具有揮發性，其含量越高，表明氨基酸被破壞的越多，因此營養價值大受影響。

2 實驗部分

2.1原理

根據《GB/T 5009.44-2003 肉與肉制品衛生標準的分析方法》進行測定。揮發性鹽基氮具有揮發性，加入堿性溶液后可以被蒸出， 用標準酸溶液滴定計算含量。

2.2 儀器與試劑、器具

2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.3 硼酸分析純，質量分數2%。

2.2.4 氫氧化鈉分析純，質量分數40%。

2.2.5 亞甲基藍-甲基紅混合指示劑 將亞甲基藍乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(2g/L)按1：1體積比臨時混合搖勻備用。

2.2.6 氧化鎂 分析純

2.2.7 100μL-1000μL移液槍

2.3 實驗部分

2.3.1取樣：精確量取5ml樣品至消化管中.加入20ml水搖勻后。

2.2.2加入1g氧化鎂固體后，迅速消化管放置于定氮儀上。

2.3.3 定氮儀設置程序如下：

稀釋水：30ml

硼酸：25ml

蒸餾時間：7min

2.3.4 儀器自動滴定并給出計算結果。

氮含量      

式中：M-標準酸摩爾濃度（mol/L)

W-樣品質量（g）

V0-空白樣滴定標準酸消耗量（mL）

V-樣品滴定標準酸消耗量（mL），精確到小數點后四位

3 結果與討論

氮含量      

式中：M-標準酸摩爾濃度（mol/L)

W-樣品質量（g）

V0-空白樣滴定標準酸消耗量（mL）

V-樣品滴定標準酸消耗量（mL），精確到小數點后四位

注意：

（1）如果測全血，儲存時應放置在低溫環境下，以防止凝結成塊。

（2）由于揮發性鹽基氮具有一定的揮發性，建議現用現取，以免造成氮損失。

（3）氧化鎂雖起到一定的消泡作用，但如果在蒸餾過程中產生大量泡沫，可按實際情況增加氧化鎂的量，或直接加入少量消泡劑。

（4）氧化鎂的加入量可根據客戶需要自行調整。