凱氏定氮儀測定大豆中蛋白質溶解比率

1 前言

蛋白質溶解比率，即大豆水溶性蛋白質含量占大豆粗蛋白質含量的百分率。水溶性蛋白質，指的是可溶于水的蛋白質。《GB/T 31785-2015 大豆儲存品質判定規則》中指出蛋白質溶解比率是大豆儲存品質關鍵指標之一。本實驗根據國標給出的方法對大豆的蛋白質溶解比率進行測定。

2 儀器與試劑

2.1儀器

K1160全自動凱氏定氮儀，SH420F石墨消解儀，離心機，分析天平 。           

2.2試劑

硫酸（分析純），20g/L硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，40%氫氧化鈉，混合催化劑（3gK2SO4、0.2gCuSO4），0.1mol/L硫酸標準滴定液。

3 實驗方法

3.1粗蛋白測定

3.1.1試樣制備

將大豆粉碎使90%以上通過60目篩。

3.1.2取樣

稱取混合均勻的樣品0.2g（精確至0.1mg）左右，加入消化管。加入混合催化劑：3g硫酸鉀，0.2g硫酸銅，沿消化管壁加入濃硫酸10mL。

3.1.3消解

3.2可溶性蛋白測定

3.2.1試樣制備

將大豆粉碎使90%以上通過60目篩。

3.2.2提取可溶性蛋白質

稱取粉碎試樣5g（精確至0.01g，本次取5.00g）于磨口帶塞錐形瓶中，加水200mL，搖勻使均勻分散，然后在25℃~30℃溫度下震蕩2h，取出后將混合液轉移至250mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻后靜置1min~2min，將上層清液倒入離心管中，在轉速為1500r/min的離心機中離心10min，再將離心液用快速濾紙或玻璃纖維過濾，收集清晰濾液于錐形瓶中，即為樣品水溶性蛋白質測定液。

3.2.3消解

吸取測定液10mL于消化管中，加入混合催化劑：3g硫酸鉀，0.2g硫酸銅，沿消化管壁加入濃硫酸10mL。

4 結果與討論

4.1實驗結果

式中50 為樣品定容稀釋倍數

4.2結論

測試結果顯示本次測試的大豆的蛋白質溶解比率為81.74%，大于《GB/T 31785-2015 大豆儲存品質判定規則》中規定的75%，屬宜存大豆。

參考文獻

[1] GB/T 31785-2015 大豆儲存品質判定規則

[2] GB 5009.5-2016食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定[ S ] .