凱氏定氮法測定醫用膠原蛋白海綿中粗蛋白質含量
1前言
膠原蛋白海綿是以牛跟腱為原材料,通過酶解、純化制取高純Ι型膠原,再根據互貫網絡技術制成。 膠原分子兼有修復、止血和填充三種作用,能夠激活內源性凝血途徑,在使用時通過壓迫創面激活內源性凝血,以達到止血效果。本文采用《中國藥典》2015年版中氮測定法第三法以全自動凱氏定氮儀進行實驗,操作簡單,測得結果平行性良好。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1160全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀
|
|
2.2試劑
硫酸(分析純)、硼酸(分析純)、氫氧化鈉(分析純)、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、硫酸鉀(分析純)、硫酸銅(分析純)、0.1mol/L硫酸標準滴定液等。
3 實驗方法
3.1取樣
將膠原蛋白海綿置于恒溫干燥箱80℃干燥3h,干燥完后放置于干燥器中備用。將樣品剪成小塊狀,然后準確稱量樣品100mg(精確至0.1mg),加硫酸鉀 0.3g 與硫酸銅 0 .02g ,再加硫酸2mL。同時做空白實驗。
3.2消解
利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,設定消解溫度參數如下表:

4 結果與討論
4.1實驗結果:儀器自動滴定并計算,計算公式如下:
4.2實驗結論
通過以上測得數據可知,利用全自動凱氏定氮儀測定醫用膠原蛋白海綿蛋白質含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節省人力等優點。
參考文獻
《中國藥典》2015年版 第四版 0704 氮測定法 第三法
