海能技術
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凱氏定氮法測定醫用幾丁糖中蛋白質含量

1前言

醫用幾丁糖是一種具有良好生物相容性、生物可降解性及生物學活性的醫用高分子多糖類物質,可以有效防止術后組織粘連。常規的蛋白質測定方法有凱氏定氮法,分光光度法以及燃燒法,其中以凱氏定氮法應用最為廣泛。但傳統的玻璃儀器具有操作繁瑣,耗時長,危險性高等缺點。本文采用《中國藥典》2015年版中氮測定法第三法以全自動凱氏定氮儀進行實驗,操作簡單,測得結果平行性良好。

2 儀器與試劑

2.1儀器

K1100F全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀

2.2試劑

硫酸(分析純)、硼酸(分析純)、氫氧化鈉(分析純)、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片)、0.1mol/L硫酸標準滴定液等。

3實驗方法

3.1取樣

稱取醫用幾丁糖樣品1.5g(精確至0.1mg),加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再加硫酸10mL。同時做空白實驗。

3.2消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化完畢后,將消化管取下冷卻。消解過程設定消解溫度參數如下表:


式中:C-標準酸摩爾濃度(mol/L)

W-樣品質量(g)

V0-空白樣滴定標準酸消耗量(mL)

V-樣品滴定標準酸消耗量(mL)


6.25-樣品蛋白系數





4.2實驗結論

通過以上測得數據可知,利用全自動凱氏定氮儀測定醫用幾丁糖中的蛋白質含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節省人力等優點。

參考文獻

《中國藥典》2015年版第四版0704氮測定法 第三法