凱氏定氮法測定小鼠飼料中粗蛋白質含量
1 前言
實驗小鼠應喂給顆粒性飼料,即將麥粉、玉米面、麥麩、豆餅、魚粉、草粉等按配方混合后制成干燥塊料或粒料。小白鼠的食量雖小,但對飼料質量的要求相對較高,必須保持營養物質的平衡穩定,富有蛋白質等,否則對其發育、繁殖和抗病能力會造成嚴重影響。《GB 14294.3-2010 實驗動物 配合飼料營養成分》中明確規定了實驗小鼠生長、維持飼料中粗蛋白的含量應≥20%。本方案采取凱氏定氮法來測定某實驗小鼠飼料中粗蛋白含量。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
K1100/1100F 全自動凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平
2.2 試劑
硫酸滴定液c(H+)=0.1018mol /L、2%硼酸溶液、40%氫氧化鈉溶液、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片等。
3 實驗方法
3.1樣品制備
取樣品適量用粉碎機打碎且混合均勻。
3.2 實驗過程
稱取制備好的樣品約0.5g(精確至0.1mg),用稱量紙包好后一并投入消化管中,加一片催化劑片(或者3g硫酸鉀、0.2g硫酸銅),加入10mL濃硫酸。
利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,
設定消解溫度參數如下表:
4.2結論
使用凱氏定氮儀測試該實驗小鼠飼料中粗蛋白含量平均值為20.324%,平行性良好,符合國標要求。
參考文獻
[1] GB/T 20193-2006 飼料用骨粉及肉骨粉[S].
[2] GB/T 6432-94 飼料中粗蛋白測定方法[S].
[3] GB 14294.3-2010 實驗動物 配合飼料營養成分[S].
