凱氏定氮法測定綠豆中蛋白質含量

前言

夏天到了，來一碗冰鎮綠豆湯最是清涼解暑。除去清涼解暑的功效，其實綠豆中還含有大量的蛋白質。《 NY/T 598-2002 食用綠豆》中對于粗蛋白含量做出了明確的規定，本文介紹用全自動凱氏定氮儀測定綠豆中粗蛋白含量的方法。

實驗部分

1.1實驗原理

       綠豆中的有機態氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉化為氨態氮。加堿蒸餾，使氨析出，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標準滴定液進行滴定。

1. 2 儀器與設備

K1100F 全自動凱氏定氮儀

SH 420F 石墨消解儀

 

1. 3 試劑與耗材

實驗中涉及到的試劑，均為優級純或分析純；實驗用水為無氨蒸餾水。

1.3.1 鹽酸或硫酸溶液：c(H ⁺ )= 0 . 1mol /L ，標準滴定液。

1. 3 . 2 硼酸溶液：質量分數 2% 。

1. 3. 3 氫氧化鈉溶液：質量分數 40% 。

1. 3. 4 溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑：將溴甲

酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 ： 1 體積比臨時混合搖勻備用。

1. 4 實驗過程

1 . 4 . 1 取樣

將樣品研磨烘干后，稱量 0.3g 的樣品（精確至 0 . 1mg ），加催化劑一片（或硫酸鉀 3g 與硫酸銅 0 . 2g) ，再沿瓶壁滴加硫酸 10 . 0mL 。

1 . 4 .2 消解

利用石墨消解爐進行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統，設定消解溫度參數如下表：

消化完畢后，將消化管取下冷卻。

1 . 4 . 3 上機測試

待消化管內溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上，開始蒸餾滴定。定氮儀設置程序如下：

 

式中：M-標準酸摩爾濃度（mol/L)

 W-樣品質量（g）

 V0-空白樣滴定標準酸消耗量（mL）

 V-樣品滴定標準酸消耗量（mL）

6.25-樣品蛋白系數

結果與討論

 根據《 NY/T 598-2002 食用綠豆》中，粗蛋白含量高于23%為二級綠豆。使用凱氏定氮儀測試綠豆中粗蛋白含量，結果準確，平行性良好。