凱氏定氮法測定葵花籽中蛋白質含量

1 前言

瓜子營養豐富，維生素、蛋白質、油類含量都屬佼佼者。并且對安定情緒、防止老化、預防成人疾病有益；能治失眠、增強記憶力；預防癌癥、高血壓、心臟病等疾病。下面為大家介紹一下葵花籽中蛋白質含量的測定方法。

2 實驗部分

2.1原理

葵花籽中的有機態氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉化為氨態氮。加堿蒸餾，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標準滴定液進行滴定。

2.2 儀器與試劑、器具

2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.3 鹽酸 分析純，c(HCL)=0.1mol/L，標準滴定液。

2.2.4 硼酸 分析純，質量分數2%。

2.2.5 氫氧化鈉 分析純，質量分數40%。

2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5：1體積比臨時混合搖勻備用。

2.2.7 催化劑片 3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片

2.2.8 10mL移液管

2.2.9 研缽

2.3 實驗部分

2.3.1取樣：將樣品磨碎，精確稱量0.5g的樣品，加催化劑一片（或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g)，再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml.

2.3.2消解：利用石墨消解爐進行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統，消化完畢后，將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式，設置參數如下：

2.3.3 待消化管內溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設置程序如下：

稀釋水：30ml

硼酸： 25ml

堿：   35ml

蒸餾時間：5min

2.3.4 儀器自動滴定并給出計算結果。

3 結果與討論

式中：M-標準酸摩爾濃度（mol/L)

W-樣品質量（g）

V0-空白樣滴定標準酸消耗量（mL）

V-樣品滴定標準酸消耗量（mL），精確到小數點后四位

5.30-樣品蛋白系數