凱氏定氮法測定揮發性鹽基氮含量
1 前言
揮發性鹽基氮多見于水產品等肉類中，它是指腐敗過程中，由于酶和細菌的作用使蛋白質分解而產生氨以及胺類等堿性含氮物質。此類物質具有揮發性，使用高氯酸溶液浸提，在堿性溶液中蒸出后，用硼酸吸收液吸收，再以標準滴定酸溶液滴定計算含量。
2 實驗部分
2.1 儀器
Hanon K9840半自動凱氏定氮儀
均質機
離心機
微量酸式滴定管：精確到0.01ml
2.2 試劑
高氯酸溶液（0.6mol/L）：取50ml高氯酸加水定容至1000ml
氫氧化鈉溶液（30g/L）：稱取30g氫氧化鈉加水溶解后，放冷，并稀釋到1000ml
鹽酸標準溶液（0.01mol/L）：吸取濃鹽酸0.85ml，定容至1000ml，搖勻。并按GB/T 5009.12003附錄B的方法進行標定。
硼酸吸收液（30g/L）：稱取硼酸30g，溶于1000ml水中。按10:1比例加入混合指示劑
硅油消泡劑
酚酞指示劑
混合指示劑：將一份2g/L甲基紅乙醇溶液與一份1g/L次甲基藍乙醇溶液臨用時混合
2.3 實驗步驟
2.3.1 樣品處理
魚，去鱗，去皮，沿背脊取肌肉；蝦，去頭，去殼，取可食肌肉部分；蟹，甲魚等（其他水產品）取可食部分；將樣品切碎備用。
2.3.2 樣品制備
稱取上述處理好的試樣10g（精確到0.01g）于均質杯中，再加入90ml高氯酸溶液，均質2min，用濾紙過濾或離心分離。準確移取5.0ml濾液于消化管中，分別加入1-2滴酚酞指示劑，1-2滴硅油防泡劑。并用5.0ml高氯酸溶液做空白試驗。
2.3.3 蒸餾
消化管就位。儀器參數設置：氫氧化鈉溶液5ml，稀釋水10ml，硼酸20ml，蒸餾5min，淋洗液10ml。
2.3.4 滴定
錐形瓶中吸收液用標準鹽酸或硫酸溶液（0.01mol/L）滴定至溶液顯藍紫色為終點。
2.3.5 計算
其中：
X-----樣品中揮發性鹽基氮的含量，單位為毫克每百克（mg/100g）；
V-----樣品濾液消耗的標準滴定酸的體積，單位為毫升（ml）；
V0-----空白樣品消耗的標準滴定酸的體積，單位為毫升（ml）；
C-----鹽酸標準溶液的摩爾濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；
14-----與1.00ml鹽酸標準滴定溶液（1.00mol/L）相當的氮的質量，單位為毫克（mg）；
m------取樣質量，單位為克（g）。
計算結果保留3位有效數字。