凱氏定氮法測定短肽型腸內營養劑中蛋白質含量
1前言
短肽型腸內營養劑,適應癥為本品適用于胃腸道功能有損失,而不能或不愿進食足夠數量的常規食物以滿足機體營養需求的應進行腸內營養治療的病人。作為營養物質,短肽型腸內營養劑含有豐富的蛋白質。常規的蛋白質測定方法有凱氏定氮法,分光光度法以及燃燒法,其中以凱氏定氮法應用最為廣泛。但傳統的玻璃儀器具有操作繁瑣,耗時長,危險性高等缺點。本文采用《中國藥典》2015年版中氮測定法第三法以全自動凱氏定氮儀進行實驗,操作簡單,測得結果平行性良好。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1100F全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀
2.2試劑
硫酸(分析純)、硼酸(分析純)、氫氧化鈉(分析純)、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片)、0.1mol/L硫酸標準滴定液等。
3 實驗部分
3.1取樣
稱取樣品0.3g(精確至0.1mg),加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再加硫酸10mL。同時做空白實驗。
3.2消解
待消化管內溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設置程序如下:
4 結果與討論
4.1實驗結果:儀器自動滴定并計算,計算公式如下:
式中:C-標準酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質量(g)
V0-空白樣滴定標準酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標準酸消耗量(mL)
6.25-樣品蛋白系數
4.2實驗結論
通過以上測得數據可知,利用全自動凱氏定氮儀測定短肽型腸內營養劑中的粗蛋白質含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節省人力等優點。
參考文獻
[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M] . 三部. 北京: 中國醫藥科技出版社, 2015:通則49.
