凱氏定氮法測定初乳堿性蛋白粉中蛋白質含量
1 前言
初乳堿性蛋白(Colostrum basic protein,簡稱CBP)。牛初乳作為一種營養珍品應用已超過50年,初乳不僅蛋白含量高,而且含有許多其它乳制品中沒有的珍稀蛋白,CBP(初乳堿性蛋白)就是其中之一,它從牛初乳中僅能萃取出萬分之四。CBP是國際上近幾年最新提取成功并用于保健領域的初乳精華。2009年被批準為新資源食品。
本文采用全自動凱氏定氮儀代替原有玻璃器具和半自動儀器完成實驗,具有操作簡便,實驗數據準確、重復性好等優點。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1160全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀,分析天平
2.2試劑
硫酸(分析純),硼酸(分析純),氧化鈉(分析純),溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片),0.1mol/L鹽酸標準滴定液。
3 實驗方法
3.1 樣品消解
稱取0.1g左右樣品,加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml。
利用石墨消解儀進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化完畢后,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式,設置參數如下:

式中:c-標準酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質量(g)
V0-空白樣滴定標準酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標準酸消耗量(mL),精確到小數點后四位
4.2結論
通過數據可知,利用全自動凱氏定氮法測定初乳堿性蛋白粉中的蛋白質含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節省人力等優點。
參考文獻
[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定[S].
注意事項
初乳堿性蛋白粉中蛋白含量較高,取樣及消解時應注意減少誤差。可以用稱量紙包裹住樣品投入消化管中,以防止樣品粘在消化管上部。實驗過程中濃酸濃堿具有強烈腐蝕性,請小心操作。
