1 前言

試樣經除去蛋白質后，以亞甲藍作指示劑，在加熱條件下滴定標定過的堿性酒石酸銅溶液(已用還原糖標準溶液標定)，根據樣品液消耗體積計算還原糖含量。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

Hanon T960全自動電位滴定儀，Hamilton高溫鉑復合電極，10ml滴定管單元，電陶爐

2.2 試劑

相關配制見附錄。

鹽酸溶液（1+1），堿性酒石酸銅甲液，堿性酒石酸銅乙液，乙酸鋅溶液，亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)，氫氧化鈉溶液(40g/L)，葡萄糖標準溶液(1.0mg/mL) 

3 實驗方法

3.1 實驗步驟

（1）樣品前處理

稱取牛奶25g，(精確至0.001g)，移置250mL容量瓶中，加50mL水，緩慢加入乙酸鋅溶液5mL和亞鐵氰化鉀溶液5mL，加水至刻度，混勻，靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，取后續濾液備用。

（2）堿性酒石酸銅溶液的標定

吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL，置于滴定杯中。加水10mL，加入葡萄糖標準溶液9mL，將電陶爐設為內環火500℃，控制在2min中內加熱至沸，然后調至300℃，趁熱以1滴/2s的速度繼續滴加葡萄糖標準溶液直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗葡萄糖的總體積，同時平行操作3份，取其平均值，計算每10mL(堿性酒石酸甲、乙液各5mL)堿性酒石酸銅溶液相當于葡萄糖(或其他還原糖)的質量(mg)。 

（3）試樣溶液測定

吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL，置于滴定杯中，加水10mL，預先加入2mL的試樣溶液至滴定杯中，控制在2min內加熱至沸，保持沸騰繼續以1滴/2s的速度滴加試樣溶液，滴定直至藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗體積(V)。

3.2 參數設置

4 結果與討論

4.1 實驗結果

（1）標定堿性酒石酸銅

式中：

X --試樣中還原糖的含量（以葡萄糖糖計），單位為克每百克(g/100g)；

m₁ --堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各半）相當于葡萄糖的質量，單位為毫克(mg)；

m --試樣質量，單位為克(g)；

F --系數，為1；

V --測定時平均消耗試樣溶液體積，單位為毫升(mL)；

250 --定容體積，單位毫升(mL)。